As lipases são enzimas hidrolíticas que hidrolisam triglicéridos em ácidos gordos livres e glicerol. O isolamento e a triagem de microrganismos lipolíticos de diferentes amostras ambientais de diferentes habitats ecológicos têm sido relativamente pouco explorados. Assim, um total de 37 bactérias e 17 fungos foram isolados de diferentes amostras ambientais e selecionados para a produção de lipase. Três isolados bacterianos e isolados fúngicos, cada um com atividade máxima de lipase no meio de ensaio de lipase, foram selecionados para estudos adicionais. O padrão de fermentação foi estudado variando parâmetros do processo, como pH inicial do meio de produção, temperatura de incubação, diferentes substratos, concentração do substrato e agitação, a fim de maximizar a produção extracelular de lipase. Verificou-se que o óleo de coco induz a melhor produção de lipase em bactérias e fungos, nos quais Acinetobacter sp. (1,45 U/ml) e Hypocrea patella (10,00 U/ml) tiveram a maior produção de lipase. Verificou-se que o período de fermentação entre 3-7 dias era o melhor para a produção de lipase em fungos e 12-24 horas em bactérias. O estudo provou que a otimização dos parâmetros de crescimento num meio de fermentação adequado tem um efeito significativo na melhoria da produção de lipase.